親子鑒定的依據(jù)

　　1、遺傳特征的分析

　　遺傳標(biāo)記的概念(genetic marker)

　　2、妊娠期限的檢查(280±14天)

　　3、性交及生育能力的鑒定

　　親子鑒定的原理

　　方法：分析單基因遺傳特征

　　原理：所用的遺傳標(biāo)記遵守孟德?tīng)栠z傳規(guī)律和終生不變。

　　判定父子關(guān)系的基本原理：

　　在肯定某個(gè)基因必須來(lái)自生父，而被控父親并不具有這個(gè)基因的情況下，可以排除親子關(guān)系；

　　在肯定某個(gè)基因必須來(lái)自生父，而被控父親具有這個(gè)基因的情況下，則不能排除其親子關(guān)系；

　　——父權(quán)概率

　　線粒體DNA多態(tài)性→母系單親的親子鑒定

　　Y染色體DNA多態(tài)性→父系單親的親子鑒定

　　基因產(chǎn)物水平的遺傳標(biāo)記

　　一、紅細(xì)胞血型

　　指由等位基因決定的紅細(xì)胞表面抗原的差異，為最早用于親子鑒定的遺傳標(biāo)記，有ABO、MN、P、Rh等21個(gè)血型系統(tǒng)。

　　簡(jiǎn)單遺傳性狀，符合孟德?tīng)栠z傳規(guī)律

　　遺傳多態(tài)性，不易受年齡、性別、疾病影響

　　操作簡(jiǎn)單、重復(fù)性好，結(jié)果明確

　　二、紅細(xì)胞酶型

　　指紅細(xì)胞多態(tài)性同工酶?jìng)€(gè)體間的差異，如EAP、ESD、PGM1等

　　方法：電泳分離＋酶譜技術(shù)

　　三、血清蛋白型

　　指由等位基因決定的人血清中同一種蛋白質(zhì)的個(gè)體差異，又稱(chēng)血清型，如結(jié)合珠蛋白型，維生素D結(jié)合蛋白型，α1一抗胰蛋白酶型等。

　　方法：電泳分離＋蛋白染色/免疫印跡技術(shù)。

　　四、白細(xì)胞型

　　指人類(lèi)白細(xì)胞抗原(HLA)，又稱(chēng)移植抗原或組織相溶性抗原系統(tǒng)，包括A、B、C、D、DR、DQ、DP等基因產(chǎn)物,具有高度遺傳多態(tài)性,是最復(fù)雜的人類(lèi)遺傳標(biāo)記。

　　方法：微是量淋巴細(xì)胞毒試驗(yàn)；混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)。

　　DNA水平的遺傳標(biāo)記

　　一、DNA的結(jié)構(gòu)與功能

　　二、DNA多態(tài)性的分子學(xué)基礎(chǔ)

　　(一)序列多態(tài)性

　　指在兩條同源染色體上，同源DNA序列長(zhǎng)度相等，但個(gè)別核苷酸不同而產(chǎn)生的個(gè)體差異，也稱(chēng)單核苷酸多態(tài)性(SNP)。

　　(二)長(zhǎng)度多態(tài)性

　　指由于片段插入、缺失或重復(fù)序列數(shù)目變異所致的DNA片段長(zhǎng)度的個(gè)體差異。

　　類(lèi)型：散在重復(fù)序列

　　串聯(lián)重復(fù)序列、倒位重復(fù)序列

　　DNA多態(tài)性的檢測(cè)技術(shù)

　　(一)DNA指紋(DNA fingerprint)技術(shù)

　　將生物檢材中細(xì)胞核的DNA分離出來(lái)，用特定的限制性內(nèi)切酶消化，后經(jīng)電泳分離，Southern印跡轉(zhuǎn)移，再用已知序列小衛(wèi)星DNA探針根據(jù)堿基互補(bǔ)原則進(jìn)行雜交，用放射自顯影等技術(shù)顯示出一系列不等距離，相互間隔的多條電泳譜帶組成的高度多態(tài)性圖譜，實(shí)質(zhì)為DNA的限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)圖像，因各人不同(同卵雙生除外)，比對(duì)結(jié)果類(lèi)似指紋，故稱(chēng)DNA指紋圖譜。

　　特點(diǎn)：

　　(1)體細(xì)胞穩(wěn)定性

　　(2)個(gè)體高度特異性

　　(3)按孟德?tīng)栠z傳規(guī)律遺傳

　　(二)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)

　　是依賴于靶DNA序列側(cè)翼上所結(jié)合的兩個(gè)寡核苷酸引物，在體外由DNA聚合酶催化合成特異性DNA片段的方法，又稱(chēng)體外基因擴(kuò)增方法，目的是從生物體的整個(gè)基因組DNA中獲取足夠量的特異性片段，以供進(jìn)一步分析。

　　特點(diǎn)：靈敏度高，特異性中，操作簡(jiǎn)單、快速。

　　PCR產(chǎn)物的類(lèi)型及作用：

　　(1)擴(kuò)增片段序列多態(tài)性

　　(2)擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性(AMP-FLP)

　　來(lái)自基因組DNA中小衛(wèi)星或微衛(wèi)星位點(diǎn)。

　　STR是應(yīng)用最廣泛的遺傳標(biāo)記系統(tǒng)

　　(1)基因位點(diǎn)多、多態(tài)性高,擴(kuò)增片段短。

　　(2)擴(kuò)增片段長(zhǎng)度相差不大，利于進(jìn)行多個(gè)STR位點(diǎn)的復(fù)合擴(kuò)增。

　　(三)DNA芯片(DNA chip)技術(shù)

　　親子鑒定結(jié)果的評(píng)估

　　一、排除親權(quán)關(guān)系

　　指分析受檢者之間的遺傳標(biāo)記，發(fā)現(xiàn)不遵循遺傳規(guī)律。

　　1、只有1個(gè)遺傳標(biāo)記違背遺傳規(guī)律，應(yīng)加測(cè)其他系統(tǒng);

　　2、有2個(gè)遺傳標(biāo)記排除，應(yīng)具體分析;

　　3、有3個(gè)或以上遺傳標(biāo)記排除，可排除親子關(guān)系;

　　二、肯定親權(quán)關(guān)系

　　指分析遺傳標(biāo)記未發(fā)現(xiàn)違背遺傳規(guī)律，可能存在親生關(guān)系；

　　根據(jù)下列指標(biāo)肯定親權(quán)關(guān)系：

　　1、實(shí)驗(yàn)檢測(cè)遺傳標(biāo)記的累積非父排除率≥99.95%；

　　2、假定父親的累積父權(quán)指數(shù)>2000，或在前概率相同條件下，假定父親的相對(duì)父權(quán)機(jī)會(huì)≥99.95%。

　　1、只有1個(gè)遺傳標(biāo)記違背遺傳規(guī)律，應(yīng)加測(cè)其他系統(tǒng);

　　2、有2個(gè)遺傳標(biāo)記排除，應(yīng)具體分析;

　　3、有3個(gè)或以上遺傳標(biāo)記排除，可排除親子關(guān)系;

　　三、單親親子鑒定結(jié)果的評(píng)估

　　指只有單親參與親子鑒定

　　方法：

　　1、根據(jù)遺傳標(biāo)記是否違反遺傳規(guī)律進(jìn)行排除。若無(wú)法排除親權(quán)關(guān)系，在親子鑒定的各位點(diǎn)的累積非父排除率>0.9990，計(jì)算其父權(quán)概率≥0.9990，可肯定親子關(guān)系。

　　2、利用不能參與一方的直系親屬(父母、兄、妹)的DNA進(jìn)行鑒定。