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篤瑪雞絨毛膜促性腺激素(CG) ELISA 試劑盒介紹

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品　　牌：
DM

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出廠價：
1 元/瓶

主要規格：
96T/48T

用　　途：
科研

雞絨毛膜促性腺激素(CG) ELISA 試劑盒酶聯免疫試驗步驟將所需試劑從4℃冷藏環境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。編號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。加樣反應：加標準品或樣本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶標記物50μl/孔，再加入50μl/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應30分鐘。洗滌：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用工作洗滌液250μl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。顯色：每孔加入底物液A 50μl，再加底物液B 50μl，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘（若藍色過淺，可適當延長反應時間）。終止：每孔加入終止液50μl，輕輕振蕩混勻，終止反應。測吸光值：用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應在終止反應后10分鐘內完成。雞絨毛膜促性腺激素(CG) ELISA 試劑盒樣品準備 1．手術取出動物組織，并秤重以確定200毫克組織重量 2．（選擇步驟）放進預冷的15毫升錐形離心管 3．（選擇步驟）加入xx毫升清理液（Reagent A）清洗1次 4．即刻用刀片切碎組織 5．放進一個預冷的15毫升錐形離心管 6．加入預冷的xx毫升清理液（Reagent A） 7．渦旋震蕩5秒，充分混勻 8．即刻放入預冷的DOUNCE勻漿器，在冰槽里用勻漿棒勻化組織（約40至80下） 9．將所有組織勻漿物移入1.5毫升離心管 10．放進4℃臺式離心機離心10分鐘，速度為10000g 11．移取500微升到新的1.5毫升離心管 12．加入xx微升穩定液（Reagent B），混勻 13．放在冰槽里待測（注意：須1周內使用）雞絨毛膜促性腺激素(CG) ELISA 試劑盒操作步驟 1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 500ng/L 5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 250ng/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 125ng/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 62.5ng/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 31.25ng/L 1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。 3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4. 配液：將30倍（48T的20倍）濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 7. 溫育：操作同3。 8. 洗滌：操作同5。 9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘. 10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。 11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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楊燕燕

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