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篤瑪 綿羊β內(nèi)啡肽(β-EP) ELISA 試劑盒 說(shuō)明書

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  • DM
  • 主要規(guī)格:
  • 96T/48T
  • 用  途:
  • 科研
    • 綿羊β內(nèi)啡肽(β-EP) ELISA 試劑盒 ELISA試劑盒檢測(cè)范圍: 人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動(dòng)物細(xì)胞因子、植物細(xì)胞因子、骨代謝、細(xì)胞凋亡、激素內(nèi)分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體、血栓與止血、腫瘤、自身抗體科研Elisa檢測(cè)試劑盒。 ELISA試劑盒檢測(cè)類型:雙抗體夾心法測(cè)抗原、雙抗原夾心法測(cè)抗體、間接法測(cè)抗體、競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體、競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原、捕獲包被法測(cè)抗體、ABS-ELISA法。 上海篤瑪生物科技有限公司主要經(jīng)營(yíng)生產(chǎn)ELISA試劑盒,抗體,原料藥,植物提取物,品質(zhì)保證,價(jià)格優(yōu)勢(shì)。 綿羊β內(nèi)啡肽(β-EP) ELISA 試劑盒 lisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因及其相應(yīng)的解決辦法 1 選擇試劑 選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡至少30分鐘。 2 加樣 可能原因: 1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣; 2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。解決辦法: 1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,最好選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。 3 孵育 可能原因: 1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗徹底; 2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗徹底。解決辦法: 1) 貼封片或加蓋; 2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。 4 洗板 可能原因: 1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不徹底;洗板針堵塞,抽吸不完全;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。 3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法: 1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后最好在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干; 2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。 5 顯色 可能原因: 1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑; 2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法: 1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流; 3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。 6 終止 可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。 7 讀板 如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。 在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸;盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)做好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。 綿羊β內(nèi)啡肽(β-EP) ELISA 試劑盒 ELISA 實(shí)驗(yàn)步驟: 1.包被抗原:稀釋液pH 9.6 碳酸鹽緩沖液,多肽濃度2ug/ml,0.1ml/孔,4oC過(guò)夜,洗凈。 2.1%BSA (pH 9.6 碳酸鹽緩沖液) 封閉,0.1ml/孔,37oC1h,洗凈。 3.稀釋抗血清(可稀釋不同濃度) 0.1ml/孔,37oC 30分鐘,洗凈。 4.稀釋辣根過(guò)氧化物每標(biāo)記的二抗0.1ml/孔,37oC 40分鐘,洗凈。 5.顯色:TMB顯色 A液:四甲基聯(lián)苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍. B液:5ul加蒸餾水12.5ml 。 終止液:2N硫酸 A液、B液各一滴,比光顯色10分鐘,終止液一滴。 6.450nm 波長(zhǎng)測(cè)OD值

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