傳統的熒光活化細胞分選方法(FACS)采用流式細胞術用來分選細胞,是分子基礎分選中普遍使用的方法。這種方法只能檢測具有熒光活性的細胞,不但細胞存活率低、純度低,而且極易破壞細胞組織。CellSorter 全自動細胞分選儀,是一款與倒置顯微鏡配合使用的,用于細胞篩選、提取、沉積的理想設備。該系統可以靈活的與各種類倒置顯微鏡配合,安裝操作也非常簡單。如果用戶已經擁有自己的顯微鏡系統,只需購買標準配件就可以將現有的系統升級為一套多功能的細胞分選平臺。
系統優勢
Ø 可直接從培養皿中進行細胞分選
Ø 分離粘結活細胞的細胞亞群,分離熒光或者冷光標記
Ø 無標記的和熒光的細胞都可通過軟件進行自動識別
Ø 可確保細胞分離后活力,并且可培養
Ø 分選熒光分子探針標記的特定細胞
Ø 單細胞收集進行進一步培養、克隆,RNA或者蛋白質制備
Ø 免疫制備,進行目標細胞分類
Ø 可對各種粘結細胞進行分類
Ø 細胞篩選前的細胞培養
Ø 一般的分選過程只需幾分鐘就可完成
Ø 使用安裝在顯微鏡上的熒光濾片可實現多通道監測
Ø 分選速度:1Cell/秒 每一個循環可篩選細胞個數:1~1000
全自動細胞分選儀配備高精度微移液管支架,控制臺始終保證微量吸液管位于視場的正中心, 并且微移液管控制臺可非常容易地安裝在物鏡上,同時軟件可對移液管的位置進行偏差校準。
微移液管的尖端可通過轉動控制臺的旋鈕進行手動聚焦,且微移液管的尖端科在顯微鏡中非常容易的被觀察到,同時顯微鏡的圖像可跟進調整; 玻璃微移液管更換非常便捷,當更換培養皿時簡單地取下來分選針頭即可。
設備特點
Ø 兼容所有的倒置顯微鏡
Ø 快速手動調節通過LED照明光源
Ø 分選針頭更換快速、便捷
Ø 可通過連接環完美的安裝到顯微鏡的物鏡上
自動單細胞沉積功能:
* 單細胞輸送到達每一個PCR管
* 滴液體積小于1ul
* 一個循環可裝滿80個PCR管
* 每個Cell沉積時間15~20秒
* 可在一個玻璃蓋玻片上原位測試單個細胞沉積
CellSorter微量吸液管非自動化的細胞沉積平臺
a. 微量吸液管的路徑。
在一個典型的分類過程中,可根據路徑對細胞進行逐個提取,有200個細胞從培養皿中被提取。比例尺:100μm。
b. 硬件仿真模擬的控制軟件。
在虛擬的培養皿中,熒光細胞被標記為綠色小球,通過微量吸液管對細胞進行提取。
c. 微量吸液管定位裝置微量吸液管布局圖。
控制臺通過物鏡環固定在物鏡上方,玻璃微量吸液管被固定在控制臺中心光軸位置。微量吸液管頂端通過LED燈照射,照射光通過微量吸液管直接被引入到物鏡。微量吸液管尖端可通過手動調節彈簧旋鈕上下移動到物鏡焦點位置。培養皿可以進行水平移動,微量吸 液管上端通過撓性導管連接到注射泵上。
計算機控制單元
全自動細胞分選儀控制臺可通過計算機USB接口控制流體閥和顯微LED照明光源,同時也可以自由地控制顯微鏡熒光快門,并且整合了高速控制閥實現流體快速、精密控制。
注射泵
全自動細胞分析儀標準配置注射泵型號為NE-1000
Ø簡易鍵盤操作界面
Ø最大可裝配一個60cc的注射器
Ø輸液率:0.73μL/小時(1cc注射器)到2100ml/小時(60cc注射器)
* 其他規格的泵也可以整合在該設備中使用。
玻璃微移液管
全自動細胞分析儀使用微量吸液管對細胞進行分選,微量吸液管內孔徑范圍為50~80um;
可根據客戶的應用提供最優的內孔徑方案;更小的微移液管可達亞微米級,用于大分子的操縱。
自動單細胞沉積到PCR管
Ø 可將單細胞移動到每一個PCR管中
Ø 一個循環可填滿10PCR條,容納80個管
Ø 蓋玻片單細胞原位沉積試驗
Ø 最小滴定體積優于1ul
Ø 15~20秒每個細胞
單細胞提取
圖a為蓋玻片上15個NE-4C單細胞培養基滴液,通過顯微鏡觀測,滴液間距為5mm。滴液體積大約為0.74 ±0.03 μl。
相位對比圖b和熒光圖c是滴液中一個完整的細胞。通過排序篩選后出現在小滴液中顯示為相位對比和熒光兩種模式,箭頭位置為滴液中的細胞。
相差(b)和(c)的熒光圖像單個細胞完整無損。在下降。在排序過程中細胞檢測的小滴在兩相襯和熒光模式。箭頭指向細胞在一個下降。
細胞損傷
3T3細胞培養圖a和提取后圖b。圖a中4個細胞用白框進行標注;圖b中注意箭頭所指位置為細胞突殘留在表面。在這個排序中只有這4個以外的一個細胞存活了。
微量吸液管的孔徑截面圖列在圖a左下角。比例尺:100mm
細胞存活
NE-4C(圖a)和3T3(圖c)細胞培養前,細胞排序后圖b、d。頂面板顯示培養出的細胞和分選后底部面板,分選的細胞用白框標注。圖e顯示細胞分選2小時后的存活狀況:NE-4C細胞左列為4個NE-4C以外的3個幸存細胞的相襯顯微鏡圖;右列為同樣的細胞通過亞甲藍染色后通過203物鏡捕捉到的圖像。3T3細胞左列為3個幸存細胞圖像,培養細胞在分選前用胰島素—EDTA預處理過。微量吸液管的孔徑截面圖列在圖a右上角。所有圖像比例尺:100mm,明視場e圖像比例尺為:25mm