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一、培養物制備
將送檢菌種或轉種的純培養物（適宜的培養基斜面，28± 1培養5-7d），確證為純培養物后，分別接種于適宜的產毒培養基中，一般菌種接種于麥芽汁-酵母膏、麥芽汁-蛋白胨及馬鈴薯-酵母膏-蔗糖三種產毒培養基中，放線菌接種于葡萄糖天門冬素培養基和高氏合成1號培養基中，紅發夫酵母接種于麥芽汁培養基和0.5%蛋白胨培養基中，置28±1培養14d。將培養物經流動蒸汽1h后，過濾，所得濾液部分于80恒溫下濃縮2.5倍備用，余者直接供實驗用。
二、小鼠毒力實驗
每種產毒液體培養基需小鼠80只，雌雄各半，分別隨機分為4組，每組10只。劑量組設置為：培養基空白對照組、培養基2.5倍濃縮空白對照組、培養物原液組、培養物2.5倍濃縮組。將受試物以20.0mL/kg BW的劑量給小鼠一次性灌胃后觀察14d，記錄實驗過程中小鼠的中毒表現及死亡情況。
三試驗數據統計
對小鼠的初始體重、終體重各實驗原始數據進行方差齊性檢驗，滿足“方差齊”要求的數據資料用兩樣本均數比較的t檢驗進行統計處理；對方差不齊的數據資料用t檢驗進行統計處理。
小鼠的初始體重各組間均衡，受試物對終體重無不良影響，實驗過程中小鼠未出現毒性反應或死亡，可判定受試菌種安全。
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